SYBR Green ® è un colorante fluorescente che si lega a doppia elica del DNA, con grande specificità. E 'ampiamente utilizzato nella ricerca di biologia molecolare per quantificare e visualizzare il DNA a doppia elica. SYBR Green ® è un colorante sintetico, che è stato introdotto nei primi anni 1990 da Molecular Probes ®, Inc. , una consociata di Invitrogen Trade Corporation. Si tratta di un colorante asimmetrica cianina, cyanines essendo una famiglia di coloranti organici sintetici che vengono utilizzati in fotografia, CD-R e DVD-R, ed in una varietà di applicazioni di ricerca di biologia molecolare.

Diverse caratteristiche rendono SYBR Green ® particolarmente utile come un acido nucleico macchia. E 'stabile in un intervallo di temperature, il che significa che può essere utilizzato per monitorare le reazioni biochimiche che avvengono a temperature alte e basse. Si lega non covalente alla superficie del DNA, che significa che non possa interferire con l'attività della nucleasi più e le DNA polimerasi. Si lega anche ad acidi nucleici su una gamma dinamica lineare di fino a quattro ordini di grandezza, in modo che possa fornire una quantificazione precisa del DNA su una vasta gamma di concentrazioni.

Il laboratorio più comuni impieghi del SYBR Green ® sono di individuare il DNA a doppia elica in tempo reale la reazione a catena della polimerasi (PCR) e in gel di acrilamide. PCR è una tecnica per amplificare alcune copie di DNA attraverso ripetuti cicli di replicazione del DNA. Real Time PCR misure l'amplificazione come avviene, e poiché SYBR Green ® si lega alla doppia elica del DNA, che misura l'emissione di fluorescenza del DNA complesso colorante consente al ricercatore di quantificare la quantità di DNA che è prodotto. Come cicli di PCR progresso, vi è un aumento della fluorescenza proporzionale alla quantità di prodotto di PCR prodotto.

gel di acrilammide sono onnipresenti nei laboratori di biologia molecolare, in quanto servono allo scopo comunemente bisogno di separare frammenti di DNA in base alle dimensioni. SYBR Green ® consente al ricercatore di visualizzare il DNA in un gel di acrilamide facendo brillare la luce della lunghezza d'onda appropriata su di esso. Altri usi di SYBR Green ® includono il rilevamento degli acidi nucleici in soluzione, nelle applicazioni biochip, e in citometria a flusso. Il complesso DNA-dye assorbe la luce blu a 488 nm ed emette luce verde a 522 nm.

SYBR Green ® è molto sensibile, è 25 volte più sensibile di bromuro di etidio, un altro comunemente usato tinture per la visualizzazione del DNA. L'alta affinità di SYBR Green ® per la doppia elica del DNA lo rende utile per individuare i campioni di DNA con basso numero di copie. Si lega preferenzialmente il DNA a doppia elica, ma può anche associare il DNA singolo filamento con fluorescenza ridotta. Come con qualsiasi molecola di DNA vincolante, SYBR Green ® può causare mutazioni ed è un possibile agente cancerogeno. E ', tuttavia, più sicuro di lavorare con e più facili da smaltire di bromuro di etidio.