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Che cosa è zimografia?

  

zimografia è una tecnica eseguita da biochimici in cui le particelle sono disperse con una carica elettrica in un processo noto come l'elettroforesi. In particolare, il processo utilizza un substrato in cui un enzima reagisce attraverso polimerizzazione con un gel polycrylamide, una soluzione a base d'acqua realizzati con materiali tossici. Questo gel zymogram è noto come dodecil solfato di sodio gel di poliacrilammide (SDS-PAGE).

Un biochimico zimografia eseguire preparerà il gel zymogram utilizzando il metodo di elettroforesi. Di solito questo metodo viene fatto in combinato disposto con l'ebollizione o ridurre il gel. Tuttavia, in zimografia, il gel SDS-PAGE è mantenuto intatto. Dopo questo passo, la parte SDS del composto viene rimosso utilizzando un materiale conosciuto come un Triton X-100 ™, un detergente ossidazione della società BASF ™. Questo materiale è mantenuto a 98 ° F (circa 37 ° C) per un periodo di tempo in un incubatore avanzata. Un biochimico poi macchia il restante materiale utilizzando un composto nero o blu. Ciò consente un ricercatore di individuare dove e come avviene la digestione da parte degli enzimi nella sostanza.

Mentre il gel SDS-PAGE è la sostanza più comunemente usato in zimografia, altri tipi di materiale può essere utilizzato per identificare il tasso di digestione e la capacità di un enzima. Molte volte questo comporta l'aggiunta di un film di amido per aiutare il processo di identificazione visiva.

biochimici e gli ingegneri biomedici comunemente utilizzare questo processo, nel tentativo di conoscere nuove forme di enzimi. Definendo il tasso di digestione e di schemi di movimento di un enzima, le diverse proprietà delle proteine umane e animali possono essere identificati. Questo viene utilizzato per alcune ricerche e di analisi genetica, nonché della droga e le applicazioni della medicina.

Il processo di zimografia devono essere maneggiati con cura. Mentre può principalmente essere fatto con le precauzioni di sicurezza minime, qualsiasi scienziato o ricercatore di movimentazione dei materiali devono essere sicuri di evitare il contatto fisico. Sia il Triton X-100 ™ detergente e il gel SDS-PAGE può essere altamente tossici per la pelle.

Ci sono un certo numero di enzimi che non rispondono come previsto a questo processo. Ad esempio, il D. melanogaster glicosidasi digerente in grado di sopravvivere processi di riduzione in altri tipi di esame digerente. Inoltre, sarà sopravvivere al processo di riscaldamento tutta la strada fino a 122 ° F (circa 50 ° C), ben oltre il livello necessario nel processo tradizionale zymographical. Quando un enzima che sopravvive al processo, senza pienamente digerire il gel SDS-PAGE, una risoluzione maggiore band è visto sulle fasi finali. Ciò può causare i problemi con l'ottenimento di risultati corretti dal processo zimografia.

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